실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
Q column의 수명(?)이 있나요?
레벨5 클레엉 (대학원생)
안녕하세요. 단백질 정제를 주기적으로 하고 있는 학생인데요, 최근에 단백질의 정제도가 약간 떨어진 것을 경험했습니다. 그래서 궁금한게 있는데요..
1. 저는 q column을 FPLC할 때 사용하는데, 칼럼을 2019년 12월 경에 사용해서 그 사이에 약 20L 정도의 E coli를 purify 한 것 같은데요, 이 정도면 칼럼의 수명이 떨어졌을까요? FPLC 는 회당 약 6회 정도 실시하고있습니다.
2. 그리고 한가지 더 궁금한게, NaCl gradient 를 이용해서 FPLC 를 하고 있는데요, Elution buffer의 NaCl 농도의 제한이 있나요? 제가 1M NaCl을 사용하다가 2M NaCl을 이용해서 잡단백질을 떨어뜨려주고 있는데요, 이게 혹시 너무 과도하거나 높은가 싶어서 여쭤봅니다.
Bio마켓 프리미엄