[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 sale 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
어시스트바이오
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
조회 977  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Q column의 수명(?)이 있나요?
개구리클레엉(대학원생)  | 2020.03.31 18:12

안녕하세요. 단백질 정제를 주기적으로 하고 있는 학생인데요, 최근에 단백질의 정제도가 약간 떨어진 것을 경험했습니다. 그래서 궁금한게 있는데요..

 

1. 저는 q column을 FPLC할 때 사용하는데, 칼럼을 2019년 12월 경에 사용해서 그 사이에 약 20L 정도의 E coli를 purify 한 것 같은데요, 이 정도면 칼럼의 수명이 떨어졌을까요? FPLC 는 회당 약 6회 정도 실시하고있습니다.

2. 그리고 한가지 더 궁금한게, NaCl gradient 를 이용해서 FPLC 를 하고 있는데요, Elution buffer의 NaCl 농도의 제한이 있나요? 제가 1M NaCl을 사용하다가 2M NaCl을 이용해서 잡단백질을 떨어뜨려주고 있는데요, 이게 혹시 너무 과도하거나 높은가 싶어서 여쭤봅니다. 

#protein
 
#purification
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2020.03.31   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Q 컬럼(Q-sephadex, mono-Q)은 강음이온 컬럼이며 모든 이온교환 레진은 사용

방법, 횟수에 따라 functional group이 조금씩 떨어져 나갑니다.

그러나 2019년 구입 후 아무리 많이 사용해도 아직 사용가능하고 관리만

잘하면 10년 정도는 사용가능합니다.

이온교환 컬럼의 elution은 주로 NaCl을 이용하고 KCl 또는 pH, buffer 농도 또한

이용합니다.

사용후 재생 시 첫단계로 NaCl을 사용하는데 보통 정제에는 1M NaCl까지

사용하고 재생할 때 2M 정도의 NaCl을 사용해도 아무런 문제가 없습니다.

개구리클레엉  |  2020.04.01   

제가 사용하는 칼럼은 Hitrap Q 칼럼인데, 이 것도 동일하겠죠?

선생님 말씀대로면 IMAC 등의 앞 과정에서 무언가가 문제가 있는거겠군요ㅎㅎㅎ 

참고하겠습니다. 감사합니다!! 

대왕개구리SPEED  |  2020.04.01   

Q 컬럼을 포함한 모든 IEX 컬럼은 동일합니다.

동일 양, purity의 단백질을 가지고 동일한 방법으로 평형화한 컬럼을 사용하여

결과 추적을 한번 해보세요. 

 

개구리클레엉  |  2020.04.01   

예 확인해보겠습니다. 감사합니다^^

답변하기
할인행사 광고 검색광고
스펙스 스펙스
EVOQUA 초순수제조장치 신년 맞이 BIG EVENT (2.28까지)
에픽사이언스 에픽사이언스
독일 Evoqua사의 올인원 초순수제조장치 이벤트 (5.30까지)
크로니텍 크로니텍
2021년 셀카운터 할인 EVENT! (2.28까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
최대 20% 할인 확인해보세요!! + NEB 상시재고 200개로 확대!! (1.28까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
sale
2/6  좌우
49,00046,600
555,000
51,50015,500
254,50076,400
153,700146,100
403,300121,000
247,80074,400
818,000777,100
249,900237,500
254,20076,300
83,50025,100
140,600133,600
398,000
920,900276,300
82,50078,400
971,000
219,90066,000
318,000
163,30049,000
146,000
23,6007,100
149,300141,900
767,100744,100
243,000
최근등록   더보기 >
마트리젤의 정확한 용도를 알고 싶습니다.   01.25
단백질 정제 후 dimer band가 나왔는데 어떻게 해야되나요?   01.24
NaOH도 오염이 되나요?   01.24
단백질이 tetramer 되는 이유   01.24
pcr산물 전기영동 결과 흐릴때   01.24
S.cerevisiae에서 ubiquitin-proteasome말고 다른 pathway로...   01.24
고단백 식사 시 나타나는 소변 속 요소의 양 변화   01.24
논문을 읽다가 저 문장이 이해가 안되네요..   01.23
cell lysis는 protein expression인가요 protein purifica...   01.23
DNase activity detection 실험시 물이 아닌 다른용매에서도 작용이 가능할...   01.23
최근답변자 우수답변자
올챙이이예이

대왕개구리SPEED

알가나다라마마마

대왕개구리강시

개구리bio

알다스

알rbsdl13

알우2

꽃개구리개그

개구리별숲

개구리ryan

개구리하늘을달려라

개구리남녀칠세마동석

대왕개구리SPEED

대왕개구리안재진

꽃개구리스카이

실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
이제욱 연재중생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고