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질문 알러지 관련 실험에서 쥐 귀에 에반스 블루를 처리하는 것에 대해.
개구리절대교주(과기인)  |  03.31 15:05

논문을 보다가 의문이 들어서 글을 남깁니다.

제가 면역에 쪽에는 지식이 별로 없다는 것을 염두에 두고 답변해주시면 정말 감사하겠습니다.

 

알러지 관련 논문을 읽다가 에반스 블루라는 시약으로 알러지의 정도를 판단하는 실험이 있었습니다.

1. 항원을 리컴비넌트로 만들고

2. 바이러스 파티클에 리컴비넌트 항원을 콘쥬게이션하고

3. 고양이에게 찔러서 예방 점종처럼 3차 부스팅 시키고

4. 시럼에서 안티-항원 IgG 나오는거 확인하고

5. 쥐 정맥주사로 Anti-Feld1 mouse IgE 를 넣어서 Feld1에 민감하게 만든 이후에... (왜 Feld1이 아니라 안티바디를 넣었는지 조차 이해가 잘 안갔어요.)

6. 고양이 serum은 protein A and G로  purified 되었고

7. Cont : No serum(purified), A group : pre-serum, B group : post-serum 주사. (어떻게 넣었는지 안써있지만 정맥주사일 것으로 예상.)

8. 24h 이후에 Evans blue를 주사받고

9. 마취된 상태에서(왜 마취를 시켰는지 모르겠지만) 리컴비넌트-Feld1을 귀에 주사함.

10. 45분 이후에 세크리파이스 하고 귀만 얻어서... KOH (염기성으로 조직을 다 녹여버리는 건가?)에 오버나잇

11. 595nm에서 측정함.

 

질문

1. 에반스 블루는 알부민을 염색하는 것으로 알고 있음. 알부민은 몸에서 일종의 케미컬 택시의 역할을 하는 것으로 알고 있음. 그런데 왜 알러지에서 이것을 이용하고 측정하나요?

 

2. 위의 5번에서 IgE를 넣는 이유가 억지로 알러지를 만들려고 하는 것인가요? 어떤 원리 또는 패스웨이로 알러지가 생기는 건가요?

 

3. 7번에서 시럼으로 부터 IgG를 프로틴A, G로 분리했다고는 하나 외부 단백질인데 찔러도 문제가 없는 건가요? 면역반응이 일어나지 않나요?

 

4. 9번은 왜 마취를 시킬 필요가 있었나요?  논문 보니까 200ul(0.5% evans blue) 였는데 정맥주사(꼬리?)로 넣기 어려워서?

 

5. 다른 논문의 사진을 보니 알러지가 일어났다는 곳에는 푸르딩딩했는데 거기에 알부민이 많이 모이는 건가요? 모인다면 왜 그렇죠?

 

 

 

글쓰는데 이상하게 타자가 잘 안쳐지는 버그가 있네요.

감사합니다.

#에반스 블루
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리클레엉  |  03.31 18:05  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

에반스 블루를 IV 로 인젝션하는 것은 vascular permeability를 확인하기 위한 용도로 알고 있습니다. 그래서 특정 조직의 일부분에 알러지를 유발하게 되면 vascular permeability가 증가해서 혈관에서 외부로 새어 나오는 것으로 알고 있습니다. IgE를 넣는 것 역시 알러지 유발시키기 위해서 인젝션 하는 것이구용. 제가 아는 지식은 여기까지네요.

9번의 경우는 45분 후 sac 할꺼라 마취하고 실험한게 아닐까 싶습니다. KOH에서 귀를 인큐베이션하는 건 Evans blue 만 추출해내서 od 값으로 밖으로 흘러나온 evans blue의 od 를 측정하는 것으로 알고 있어요! 

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