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질문 혈청(serum) 분리 시 온도와 시간 궁금합니다
알메제(대학생)  |  03.31 11:42

안녕하세요.

마우스 serum을 이용한 ELISA를 위해, 혈청 분리를 하려고 하는데요

기관 내나 선임분들 BRIC 에서의 검색해본 프로토콜이 조금씩 다 달라서ㅜㅜ

좀 더 정확한 정보를 얻고 싶어서 질문 드립니다.

 

현재 저희 랩에서 사용하는 프로토콜은요

혈액을 채취해서 tube를 바로 아이스에 꽂아서 그대로 한시간 정도 둔 다음에

centri를 20분 4도 10000rpm 에 돌려서 가라앉히고 위에 혈청을 따서 -80에 보관했다가 필요시 사용하는데요.

 

찾아보니까 혈액은 아이스가 아닌 실온에서 굳혀야 하고, 또한 너무 오래 굳혀놓으면 오히려 혈액 내 엔자임 등이 소모된다고 하는데

 

그러면 혈액 채취 후 실온에서 대략 10~20분 굳힌 후에, 4도씨가 아닌 그냥 실온에 있는 센트리로 20분 10000rpm 돌려서 혈청을 딴 후 보관하면 되는 건가요??

아니면 실온에서 굳힌 후, 센트리를 돌릴 땐 4도에서 돌려야 하나요??

 

제가 잘못 알고 있는 부분을 정정해주실 분들 대답 부탁드립니다ㅜ.ㅜ

감사합니다.

#serum
 
#혈청
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  03.31 12:07  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

혈액은 실온에서 15 ~ 30분안에 굳습니다.

tube를 흔들어 보면 굳는 시간 확인이 가능합니다.

원심분리는 10krpm은 너무 강하게 돌리는 것이고 최고 3000rpm에서 10분간 4도

조건에서 진행하고 혈청 보관은 소량씩 나눠서 -20 또는 -80도에서 보관하면

됩니다.

알메제  |  03.31 13:32  

답변 감사합니다!

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