[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
라이카써머캠프
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Cell Biology > etc.
조회 299  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 bone marrow cell
개구리동물사랑 *^^*(과기인)  | 03.30 16:49
bone marrow cell 프랩할 때 셀이 너무 적게 나와요...

어떻게 해야 할지....

고수님들 도와주세요 ㅜㅜ
#bone marrow cell
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
...  |  03.30 17:05   

제가 했던 방법과 구글링 하시면 나오는 protocol들 내용 기준으로 말씀 드리면,

개인적으로 제일 중요한 과정은 뼈 내에 골수세포를 얼마나 깨끗하게 씻느냐에 있는 것 같습니다.

배지로 뼈가 투명해질정도로 여러번 씻으면 저는 약 5*10^7 cell 정도는 개체간 차이없이 나왔던것 같습니다~ 

핸들링이 익숙해지셔야 겠지만, 처음에는 배지양을 많이 사용해서라도 깨끗하게 씻긴 정도가 어느정도인지 감을 잡으시면 그 이후에 점점 사용하는 양을 줄여가면서 동일한 결과를 얻으실수 있을꺼예요!

 

적게 나온다는 기준이 어느정도 되는건가요?

경험상 tibia는 하나정도 부러져도 전체 cell 수가 이후 실험이 어려울만큼 타격입지는 않았습니다.

개구리동물사랑 *^^*  |  03.30 17:49  
실험 못 할 정도로 적어서 연습 중 인데 너무 적게 나와요...ㅜㅜ 그래서 좌절인데요. 내일은 메디아 양 늘려서라도 많이 씻어야 할 것 같습니다.고맙습니다^^
...  |  04.01 13:20   

저는 씻는 배지는 아끼지 않고 썼어요ㅎㅎ 개체당 약 15ml 정도는 여유있게 생각해서 준비했던것 같아요. 

나중에는 배지가 아까워서 PBS(2% FBS) 배지로 washing 했는데, 회수율에 크게 영향 주진 않았어요ㅎㅎ 배지 사용이 부담스러우시면 참고하시면 좋을것 같아요 

 

뼈 양 끝을 cutting 하실때 어느정도로 하는 게 좋을지도 잘 유의해서 하시면 좋을것 같아요 ㅎㅎ 너무 바짝 자르면 needle이 안들어가고 너무 많이 자르면 cell이 소실되니까요

저는 needle 들어갈 정도로 최대한 바짝 잘라서 했어요.

 

두번째로는 개인적으로 aspiration를 주의해서 하시면 좋을것 같아요! 모든 세포실험이 그러하긴 하겠지만 ㅎㅎ cell pellet이 단단하지 않은 상태에서 배지를 너무 많이 제거하면 세포가 많이 소실 되겠죠ㅎㅎㅎ

저는 처음 BMC을 얻고 centrifuge할 때는 pellet이 단단하지 않아서 좀 보수적으로, counting 직전 단계에서는 최대한 제거하는 식으로 진행했었어요~

 

좋은 결과 있으셨으면 좋겠네요 화이팅 하세요~!

답변하기
할인행사 광고 검색광고
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Oragene Collection kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Omnigene·GUT Collection Kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
High Multiplex RNA/Protein Expression Analysis System / taco.. (12.24까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 상반기 프로모션 안내 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (8.8까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
4/6  좌우
52,60050,000
125,500119,300
17,000
92,30087,700
493,000
773,000734,400
93,20088,600
139,000132,100
109,000
143,800136,700
6,000
66,50063,200
136,000129,200
49,000
482,000
339,400322,500
23,000
468,000
739,000702,100
370,000
130,500124,000
482,000
79,50075,600
47,20044,900
최근등록   더보기 >
akta fplc 사용해보신 분 계실까요?   07.12
마우스 정맥주사 후 다시 주사 가능한 기간 질문입니다.   07.11
A.flavus paper disc 실험   07.11
Hepes solutin이 HBS랑 같은건가요?   07.11
용액을 희석시 DW말고 다른 용액으로 제조가 가능한가요?   07.11
sequencing 결과. 추가 서열에서 새로운 Exon 존재 가능성이 있나요?   07.11
Multiple reference genes   07.11
DNA Similarity   07.10
western bolt 단백질띠가 안보여요 ㅠㅠ   07.10
피부병 치료 가능여부를 판단할 수 있는 실험을 설계하고 싶습니다!   07.10
울산대학교 의과대학
제품평가
[비아이코퍼레이션]
e브릭몰(연구용 제품 온라인 구매 사이트)
비아이코퍼레이션
모집인원: 50명
모집기간: ~7/15까지
신청조건: BRIC 회원
평가자 혜택

- 참가자 전원 3만원 상품권 제공

제품평가자 모집중
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크