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질문 ELISA 정량 방법 질문있습니다!
올챙이구구갸갸(대학원생)  |  03.29 10:55

ELISA 결과가 너무 반대로나와서 정량을 하고 해야할거같아서 요

Ex) MMP-1 이 UVB자극에의해 HaCaT cell 에서 유발이되야하는데 오히려 Control에서 더많이 발현이일어나요...

Hyaluronan 경우에는 UVB자극에의해 HaCaT cell에서 감소해야하는데 오히려 UV자극에의해 유발이일어나서.. 4번을 실험했는데 4번다 비슷한결과가나왓습니다 cell수는 일정하게 했습니다.

 

상층액은( serumfree 상층액입니다)

그래서 BCA나 Bradford assay를 이용해 상층액 정량후 ELISA 진행을하려하는데 혹시 이래도 맞는건지 궁금해서 여쭤봅니다!

ELISA Kit 은 모두 DUOSET 으로 이용하고있습니다

결과가 너무이상하게나와서 속상하네욤 ㅠ_ㅠ..

 

 UV조사했을경우 Celldeath가 20~30%정도 일어나는데  정량을 안해서 인지... 어떻게해야 결과가 나올런지원.. 혹시몰라 정량해서 해보았는데 결과가 원하는대로 나오긴했는데 이게 과연 옳은건지 궁금합니다!

#정량
 
#ELISA duoset
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  03.29 11:13  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

정량한다고 cell 수에 대한 보정이 되지 않습니다.

현재 결과에서 정량을 하면 cotrol 값은 내려가고 sample 값은 올라가기

때문에 원하는 결과처럼 보이지만 잘못된 계산입니다.

cell 수가 20 ~ 30% 차이가 나기 때문에 cell 수를 보정하려면 reference 단백질을

측정해서 보정을 해주면 됩니다.

그러나 ELISA는 일반적으로 정량하지 않습니다.

아니면 WBT으로 MMP-1을 측정해 보세요.

UV 처리 실험을 어떤 방법으로 진행 했나요?

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