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조회 383  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 ITPG induction test시 lysis 안하나요.?
알갈릭중독(대학생)  |  03.27 23:48

실험실에 들어간지 얼마 안되는 학생입니다! 

transformation, subcloning 진행하고 (rosetta2 이용)

IPTG 넣고 3~4시간 후 SW 넣고 SDS-PAGE 에 sample loading했는데

IPTG test는 단백질 발현을 보는거니까 lysis 해서 cell 을 깨야하지 않나요.?

 

#ITPG induction
 
#IPTG induction test
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  03.28 07:16  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

보통 SDS-PAGE에 사용하는 sample buffer에는 SDS 같은 detergrnt가 들어 있어서 cell을 깨는 역할을 합니다.

protein sample에 SDS 가 들어간 buffer를 넣고 끓여주면 됩니다.

대왕개구리SPEED  |  03.28 09:13  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

보통 cell 내 단백질 확인 시 G(-) 균은 SDS + heating 조건에서 lysis되지만

G(+) 균은 SDS + heating 조건으로는 lysis 되지 않습니다.

알갈릭중독  |  03.28 16:43  

아 감사합니다! 근데 sample buffer 넣고 얼린다음에 다음날 IPTG loading 하려고 하는데 boiling을 하고 얼리는게 맞는건가요? 아니면 다음날 녹이면서 boiling 하면되나요.?

대왕개구리SPEED  |  03.28 18:05  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

바로 heating 해도 되고 다음날 heating해도 됩니다.

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