실험 Q&A Cell Biology > Viability
CCK-8 질문
레벨1 ecosci (대학원생)
안녕하세요.
대학원 석사과정에 있는 학생입니다.
최근에 CCK-8 실험을 하였는데, 결과가 너무 이상하여 문의드립니다. ㅠㅠ
저는 세포에 특정한 chemical을 농도별로 처리하고 CCK-8 를 진행하였는데요.
시약은 DOJINDO에서 구입하여 사용하였습니다.
흡광도를 측정하고, survival rate %를 계산하기 위하여, datasheet에 따라 다음과 같이 계산하였습니다.
blank (A b)는 세포 없이 chemical을 각 농도만큼 포함되어 있는 media만 넣었고,
negative control은 세포가 있는 상태에서 chemical이 없는 일반 media를 넣어서 진행하였습니다. (negative control과 control은 똑같은 well입니다.)
chemical 자체가 색깔을 띄기 때문에 blank가 농도가 높아질수록 높게 나와서 sample값에서 blank값을 빼주었습니다.
그래서 다음과 같은 결과를 얻었는데요..
CTL의 평균 흡광도가 0.607정도로 chemical이 고농도로 갈수록 ctl보다 높아서 그런지 계산 값이 마이너스가 되는 등 이상하게 나왔습니다.
제 방식에 문제가 있는 걸까요?
CCK8을 해보신분 계시면 조언부탁드립니다.
감사합니다.
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