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절대적인 수치로 몇도 차이까지 문제없다라고 말하기는 어려울것 같습니다.
어떤 primer는 7도 차이도 잘 증폭되는 반면 어떤 primer는 5도 차이도 증폭이
잘 안되는 경우도 있습니다.
따라서 최대한 Tm 차이가 없이 디자인 하는 것이 가장 좋습니다.
primer 디자인 할 때 F/R을 똑같은 길이로 디자인 하지 않아도 됩니다.
Tm이 높은 primer를 기준으로 Tm이 낮은 primer의 길이를 몇mer 늘여서 Tm을
비슷하게 맞추는 것이 편합니다.