실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
primer Tm값 설정이 잘 안될 때
레벨2 찡찡이잉 (대학원생)
forward primer 와 reverse primer의 Tm값의 차이가 너무 크면 안되는 걸로 알고 있습니다.
그래서 (snapgene사용) 최대한 그 간격을 줄여보려고 하지만
Restriction enzyme site도 같이 넣어주어서 만든 primer라서
나중에 잘려나갈 부분을 염두에 두고 그 부분에
다른 서열을 추가하고 빼보아도
자꾸 multiplebinding site가 생기거나 아니면 25mer를 넘어가는 경우가 생깁니다ㅠㅠ
이런 경우에 선배님들은 어떻게 해결하시나요?
친절한 답변 기다리고 있겠습니다ㅠㅠ
-대학원새내기
Bio마켓 프리미엄