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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 96well SH-SY5Y 배지 교체시 일부가 떨어집니다. 도와주세요.
알장어초밥(대학원생)  |  03.24 19:02

안녕하세요,

현재 SH-SY5Y 셀라인을 이용해서 96well에 약물 독성 실험을 하고 있습니다.

일정량의 셀을 96well에 깔고 하루 뒤, 96well을 아래로 살짝 기울여서 파이펫으로media를 빼고 약물을 dilution한 media로 교체를 했는데 마치 쥐가 파먹은 듯이 잘 깔려있던 plate 내 셀의 일부가 사라졌습니다.

혹시 교체 방법이 문제인가 싶어, suction을 아주 약하게 하거나 기울이지 않고 파이펫을 쓰거나 또는 매우 천천히 빨아들이는 등의 방법을 취했으나 여전히 일부 셀들이 떨어진 것 처럼 보입니다. (떨어지는 양이 좀 많습니다.)

혹시 제가 Media 교체를 잘못하고 있는지요? 아니면 핸들링의 문제인가요?

감사합니다.

#Cell culture
 
#96well
 
#media
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리지나가는사람  |  03.26 10:43  

SH-SY5Y cells 의 cell properties 는 mixed ( adherent and suspension ) 으로 알고 있습니다만,

선생님께서 media 를 제거하시고 dilution 한 drug media 로 교체를 해주셨다니.... 뭔가 이해가 잘 되지 않습니다.

보통은 SH-SY5Y cell 의 경우 sup 을 얻고 centri 후, 새로운 media or drug media 를 cells 에 처리하여 분주하는 것으로 알고있습니다.

개구리Q.E.D.  |  04.04 18:23  
저도 SK-N-SH와 SH-SY5Y를 사용해 봤는데
애네가 종루에 따라 다르지만
원래 정말 잘 떨어져요 ㅜ,ㅜ
트립신을 안 써도 잘 떨어지는 세포라서
핸들링 문제가 우선은 크구요

그래서 96well에 아예 실험용으로 깔고
거기에 약물을 계산해서 넣어서
실험을 해야 합니다.
그 이후에 모으는 거구요~
웬만하면 중간에 배지교체 추천 안합니다
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