[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
라이카써머캠프
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Cell Biology > etc.
조회 370  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 IL-6 kit assay
올챙이가즈아분자생물(대학원생)  | 03.23 16:40

IL-6 kit protocol 정리하고 있는데 영어가 많이 미흡합니다..

3. Standard dilution on the microwell plate (Alternatively the standard dilution can be prepared in tubes - see “External standard dilution“ on page 3): Add 100 μL of Sample Diluent in duplicate to all standard wells. Pipette 100 μL of prepared standard (see Preparation of Standard “Mouse IL-6 standard“ on page 3, concentration = 4000.0 pg/mL), in duplicate, into well A1 and A2 (see Table 1). Mix the contents of wells A1 and A2 by repeated aspiration and ejection (concentration of standard 1 S1 = 2000 pg/mL), and transfer 100 μL to wells B1 and B2, respectively (see Figure 7). Take care not to scratch the inner surface of the microwells. Continue this procedure 5 times, creating two rows of mouse IL-6 standard dilutions, ranging from 2000.0 to 31.3 pg/mL. Discard 100 μL of the contents from the last microwells (G1, G2) used. In case of an external standard dilution (see “External standard
dilution“ on page 3), pipette 100 μL of these standard dilutions

4. Add 100 μL of Sample Diluent in duplicate to the blank wells.
5. Add 50 μL of Sample Diluent to the sample wells.
6. Add 50 μL of each sample in duplicate to the sample wells.

이부분 어떻게 진행하라는건지 모르겠습니다.

번역기돌려봐도 음,, 정확하게 모르겠네요 도와주세요 ㅠ

#IL-6
 
#protocol
 
#ELISA
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
..  |  03.25 12:08   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

STD를 well에서 직접 희석해서 사용하라는 말이네요

1. 모든 well에 100ul의 sample diluent를 duplicate로 분주
   (96well은 8X12니까 위에서부터 아래로 7칸 총 14well에 분주함)

2. 제일 첫줄(A1, A2(duplicate로 분주했으니까 well이 2개겠죠))에 4000pg/ml의 STD를 100ul씩 분주후 여러번 pipetting으로 mixing.
-> 첫번째 STD의 농도는 최종 2000pg/ml이 됨.

3. 2.에서의 A1, A2의 용액(2000pg/ml)를 그 다음 줄인 B1, B2에 100ul 씩 분주
   (이미 B1, B2에는 sample diluent가 100ul씩 분주되어 있겠죠?)

4. 동일하게 여러번 pipetting으로 mixing
-> 두번째 STD의 농도는 최종 1000pg/ml이 됨.

5. 이렇게 계속 반복해서, 최종 31.3pg/ml이 될때까지 serial diluetion을 진행하여 총 7개의 STD를 만듬. (2000, 1000, 500, 250, 125, 62.5, 31,3)

6. 마지막 STD well(G1, G2) 은 100ul 버리기
   (모든 STD의 loading양을 100ul 으로 동일하게 만들기 위해)

7. blank 칸에 100ul 씩 sample diulent 분주

8. sample 칸에는 sample과 sample diulent를 각각 50ul씩 duplicate로 분주
-> 모든 sample 칸에는 총 100ul 의 2배 희석된 sample이 들어있게 됨

*serial diluetion 시 pipetting 등으로 인해 well 이 긁히지 않도록 주의할 것

 

+ well에서 STD를 희석하라고 되어있는데 혹시 invitrogen 인가요ㅎㅎ
   저라면 well에서 직접 희석하는 것보다 eppen tube에서 serial diluetion 하고 100ul 씩 duplicate로 loading 할것 같네요~ 그렇게 하는게 well에 스크래치도 안나고 더 정확하지 않을까요ㅎㅎ

 

실험 화이팅 하세요~

답변하기
할인행사 광고 검색광고
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Oragene Collection kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Omnigene·GUT Collection Kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
High Multiplex RNA/Protein Expression Analysis System / taco.. (12.24까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 상반기 프로모션 안내 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (8.8까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
5/6  좌우
125,500119,300
6,000
49,000
773,000734,400
52,60050,000
17,000
47,20044,900
493,000
130,500124,000
66,50063,200
143,800136,700
370,000
468,000
482,000
739,000702,100
92,30087,700
79,50075,600
23,000
109,000
482,000
139,000132,100
339,400322,500
136,000129,200
93,20088,600
최근등록   더보기 >
sequencing 결과. 추가 서열에서 새로운 Exon 존재 가능성이 있나요?   07.11
Multiple reference genes   07.11
DNA Similarity   07.10
western bolt 단백질띠가 안보여요 ㅠㅠ   07.10
피부병 치료 가능여부를 판단할 수 있는 실험을 설계하고 싶습니다!   07.10
caco-2 cell morphology 변화- 포도송이모양   07.10
고등학생 플라보노이드 에탄올 추출법   07.10
his-tag 정제 중 non-specific 밴드 elution 때문에 질문드립니다.   07.10
혈액(혈장,혈청)샘플 사용에 관해 궁금한 것이 있습니다.   07.10
습윤 드레싱 연구에서 water absorption/donation에 대해서 설명해주세요   07.10
데일리파트너스
제품평가
[비아이코퍼레이션]
e브릭몰(연구용 제품 온라인 구매 사이트)
비아이코퍼레이션
모집인원: 50명
모집기간: ~7/15까지
신청조건: BRIC 회원
평가자 혜택

- 참가자 전원 3만원 상품권 제공

제품평가자 모집중
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크