실험 Q&A Cell Biology > Viability
Detroit 551 (fibroblast)의 MTT 실험
레벨1 dlsh3035 (대학원생)
안녕하세요ㅠㅠ fibroblast로 처음 실험해보는 석사생입니다.
제가 졸업 논문으로 동물실험 하기 전 fibroblast 세포로 sample 독성실험을 해보려고 하거든요.
근데 제가 알기로 sample에 독성이 없다고 가졍했을때 fibroblast로 MTT 실험을 하면 control보다 값이 커야하는걸로 알고 있는데 실험 결과들이 다 control 보다 낮게 나와서요..
그래서 결국은 제가 질문드리고 싶은것이..
1. sample에 독성이 없을때 위에 말한대로 결과가 나와야하는게 맞나요?
2. 혹시 Detroit551로 mtt하신 고수님들 프로토콜이나 기술 좀 알려주실 수 있나요ㅠㅠ? 혹시 제가 실험을 잘못하고 있는건가 싶어서요..
3. raw data가 0.4~0.6 사이로 나오는데 너무 낮게 나오나요? raw data가 1이 넘어가면 세포 양이 너무 많아서 sample의 순수한 독성을 알 수 없다고 하셔서요.. (그래서 현재 96well에 0.5x10^4/well 이렇게 깔아서 하고 있는데 너무 적나요..?)
저희 실험실에 박사님이 작년에 나가시고 해서 물어볼만한 선배님이 안계시네요ㅜㅜ fibroblast 세포로 처음 키워보다 보니 모르는 부분이 많아서요..
고수님들 부디 조언 부탁드립니다!!
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