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질문 Tris 버퍼 질문드립니당
올챙이Weierstrass(대학생)  |  03.13 10:14
첨부파일 파일첨부: EE447B2A-9B46-4009-9E98-36F181780014.png (1.25 MB)
이미지 첨부파일
다음과 같은 프록토콜로(Protein methods 라는 책을 참고해서 만들었습니다) Native-PAGE를 실시 하려고 0.5M Tris pH6.8 Buffer을 제작하려고 하였습니다.
몰 계산을 해본 결과 프록토콜대로 Tris-HCl 을 저대로 넣으면 0.5M이 아니고 Tris 를 넣으면 0.5M이 되네요...
책이 잘못된건가요?(저희는 Tris파우더 하고 Tris-HCl 파우더 둘 다 있어요)
혹시나해서 Tris-HCl을 6g 넣으니 pH4.116 나와서 염산을 넣어 pH6.8을 만들 수 없는 상황이더라구요..... Tris-HCl 대신 Tris 사용이 가능한건가요?
책에서 Sol B는 1.5M Tris-HCl 이라고 나와있는데 들어가는건 Tris만 들어가고, Sol C는 0.5M Tris 라고 나와있는데 들어가는건 Tris-HCl 이네요... ㅠㅠ
#Tris
 
#Tris-HCl
 
#Native-PAGE
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  03.13 10:22  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Tris-base를 잘못 표기한 겁니다.

Tris를 M 농도 만큼 넣고  HCl로 pH를  맞추고 DW로 mass-up하면 됩니다.

올챙이Weierstrass  |  03.13 10:23  
감사합니다. 그럼 책 표기 오류로 생각하면 될까요?! 그리고 Tris가 잘 안녹더라구요.. 특히 1.5M 에서요.. ㅜㅜ
대왕개구리SPEED  |  03.13 10:33  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

네.. 전기영동에 사용하는 Tris buffer는 Tris(-base)를 HCl로 pH를 맞추면 됩니다.

1.5M도 녹이기 별로 어렵지 않습니다.

pH 맞주기 전 Tris를 녹이는 DW 부피를 최대한 많이 넣고 녹이면 잘 녹습니다.  

올챙이Weierstrass  |  03.13 10:42  
아... 이친구가 만든지 이틀 된 친구인데 첫날 만들고 그 다음날 보니까 뿌옇게 아직 안녹아서 그날 교반기 돌리고 오늘 봤는데도 뿌연색이라서 흡 ㅠㅠ 트리스가ㅜ오래되면 그럴 수 있나요? 2017년 개봉인데
대왕개구리SPEED  |  03.13 10:45  

제조회사, cat no.가 어떻게 되나요?

올챙이Weierstrass  |  03.13 10:48  
BioShop 의 Tris 입니다. 카탈로그넘버는 TRS001.1 이에요..
대왕개구리SPEED  |  03.13 11:28  

확인 해보니 제품은 문제 없습니다.

만든 방법을 자세히 알려주세요.

올챙이Weierstrass  |  03.13 12:17  
Tris 18.2g을 저울로 잰 후에 용기에 넣었습니다.
그 후 물을 80ml 정도 채운 후 마그네틱바를 넣고 교반기에 올려놓고 섞었습니다. 그런데 몇시간이 지나도 뿌연 상태를 유지합니다... 그래서 일단 꺼내고 HCl을 넣고 물을 100ml로 맞춘 후 교반기에 올렸는데도 안녹습니다... 뿌연색이에요...
대왕개구리SPEED  |  03.13 12:34  

혹시 다른 lab에서 tris를 빌려서 만들어 볼수 있나요?

안녹을 상황은 아닌것 같습니다.

올챙이Weierstrass  |  03.13 12:46  
아 ㅎㅎ 넵 감사합니다
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