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"PCR 후 전기영동하고 밴드를 확인하는데 예상했던 밴드 사이즈에서
조금 차이가 있습니다."와 같이 주관적인 설명 보다 전기영동 관련 문제는
젤 사진을 첨부하는 것이 좋습니다.
분자량이 낮게 나오는지 높게 나오는지 모르겠지만 우선 다른 분자량 마커가
있으면 여러 분자량 마커를 동시에 전기영동해서 다시 확인해 보세요.
분자량 마커의 분자량에 오차가 있는 경우가 종종 있습니다.
PCR 후에 젤을 내릴때, 뭐 발현양의 차이를 보기 위해서는 각 sample의 DNA 밴드의 굵기가 다를 수 있습니다.
DNA 밴드의 굵기와 조금 차이나는 밴드의 위치가 신경 쓰이면 각 PCR product를 같은 농도로, 특히 옆에 같이 걸어준 DNA 마커 밴드의 굵기와 유사할 정도로 DNA 농도를 조절해서 다시 걸어보세요.
아마도 DNA 농도가 유사하면 배밴드 위치가 같을겁니다.
왜 이런 현상이 나타나냐하면, DNA의 양이 많을수록 DNA 밴드가 agarose gel 상에서 다소 빠르게 가는것처럼 보이거든요.
설명 고맙습니다.
농도를 다르게했는데 사이즈 같게 나오네요.
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레벨6
Applied_Microbe
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20.03.07 06:52
강시님 의견이 맞는것같요
농도가 진하면 밑으로 쳐지더라고요