[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 sale 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
검색광고안내
한국한의약진흥원
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > etc.
조회 1064  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 gelatin zymography 결과 band가 뜨지 않아요
알BoAzzang(대학원생)  | 03.05 16:30
첨부파일 파일첨부: 자이모모.jpg (257 KB)
이미지 첨부파일

https://www.abcam.com/protocols/gelatin-zymography-protocol

시약들은 위의 링크에 있는 abcam 레시피대로 제조해서 7.5% gelatin gel 만들었구요 media가 아닌 lysis buffer를 이용해서 (1% NP-40대신 0.1% triton X-100) cell collecting한 후 cfg하고 supernatant만 collecting한 다음 5X sample buffer랑 섞어서 gel loading했습니다. incubation은 37'C 48시간 했어요

 

Western blot으로 MMP1, 5, 7 모두 나와서 zymography로 2랑 9를 보려는데 안나오네요..

처음 해보는 실험이라 trouble shooting을 잘 못하겠는데 뭐가 문제인지 짚어주신다면 감사하겠습니다 ㅠㅠ

#zymography
 
#gelatin
 
#MMP
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  03.05 16:40  

gel에 gelatin을 넣었나요?

알BoAzzang  |  03.05 16:57  

넵 recipe대로 

1.5M tris ph 8.8 2ml/ 30% acrylamide 2mL/ DW 2mL

Gelatin(4mg/mL) 2mL, SDS, APS, TEMED 넣어서 seperating gel 만들었어요

대왕개구리SPEED  |  03.05 17:47  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

gel을 보니 gelatin이 안들어간것 같습니다.

gel에 정상적으로 gelatin이 들어가면 아래 사진처럼 보입니다.

upload_image

알BoAzzang  |  03.06 10:18  

감사합니다 ㅠㅠ 다시 제조해서 처음부터 해보겠습니다!!

답변하기
할인행사 광고 검색광고
인성크로마텍 인성크로마텍
세계에서 가장 빠르고 간편한 16S NGS Library Prep 키트 (데이터 분석 리포트 포함) (12.26까지)
비투바이오 비투바이오
B2BLACK FRIDAY: Sorenson, VOLO 등 실험실 소모품 2020년 마지막 할인! (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Lucigen Competent cell 20% 할인행사 / nanostring DSP CTA / Fluor.. (12.8까지)
바이오닉스 바이오닉스
2020년 바이오닉스는 TECAN의 공식 파트너로 런칭! (런칭 프로모션 진행중) (1.24까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 하반기 프로모션 행사 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (12.31까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
sale
2/6  좌우
230,000
158,40047,600
245,20073,600
139,000132,100
793,400753,800
739,000702,100
47,20044,900
136,000
136,000129,200
143,800136,700
242,400230,300
80,40024,200
388,500116,600
79,50075,600
201,30060,400
50,00015,000
924,000
238,70071,700
22,7006,900
309,000
379,000
555,000
887,200266,200
246,60074,000
최근등록   더보기 >
용매분획 관하여 질문있습니다..   11.27
isosorbide dinitrate 가수분해 되나요?   11.26
RNA 농도측정 관련   11.26
미생물 사용에 대해서 질문 드립니다.   11.26
암세포 배양하기 - 기초 (MKN45, HT-29)   11.26
Endotoxin test   11.26
RT-PCR 후 전기영동(아가로즈 1.5% 겔) 시 새는 현상 질문드려요.   11.26
약물 처리 몰농도 계산   11.26
동결건조(freezedry)할 때 샘플이 자꾸 녹아요...   11.26
primer 제작 시 multi binding site 확인 질문입니다!   11.26
제품평가
[바이오탭스]
Mini Magnet Virtical Electrophoresis System
바이오탭스
모집인원: 15명
모집기간: ~12/9까지
신청조건: BRIC 회원
평가자 혜택

- 참가자 전원 2만원 상품권 제공
- 평가후 평가제품 구매 시 알루미나 플레이트와 콤 5개 제공
- 우수평가자 3명에게 5만원 상품권 추가 제공

제품평가자 모집중
최근답변자 우수답변자
대왕개구리SPEED

대왕개구리안재진

뒷다리Silence

올챙이방탕소년

알Starflower

개구리동물연구

알systemic

알천향루

꽃개구리느림보

꽃개구리개그

개구리달려라~

개구리G.P.Ts

개구리flu...

개구리지냐

꽃개구리visavis

개구리SPPG

실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
이제욱 연재중생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고