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질문 샌드위치 엘리사에 대한 질문입니다
알Wngpzzang(대학생)  | 03.02 00:08

샌드위치 elisa 실험 수행할 때., 

1,2차 항체가 같은 종에서 유래했는지 혹은 다른 종에서 유래했는지와 상관없이

단백질의 다른 에피톱만 인식하면 사용해도 되나요..?

아니면 두 항체를 꼭 서로 다른 종의 것을 사용해야하나요??

 

#Elisa
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  03.02 11:26  

1st, 2nd Ab가 같은 종 유래라면 반응이 일어나지 않습니다.

1st Ab의 항원(epitope)은 target protein

2nd Ab의 항원(epitope)은 1st Ab

 

 

ol드  |  03.02 14:08   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

지금 물어보시는게.. 샌드위치 ELISA 라고 하시면

1차,2차 항체를

membrane에 coating한 항체를 1차라고 하는건가요?

아니면 Ab coating - Ag binding 시킨후에

binding된 Ag에 붙일 항체 1,2차를 말하는 건가요??

알Wngpzzang  |  03.03 00:15  
막에 코팅한 항체를 1차,
그리고 단백질에 붙는 또 다른 항체를 2차 항체라고 말한거였어요!!
알Wngpzzang  |  03.03 00:17  
첨부파일 파일첨부: image.jpg (1,456 KB)
이미지 첨부파일
그림 첨부해요...!
chi-youn@hanmail.net  |  03.04 21:27   

1. 그림처럼 ELISA를 하실거면, 1차, 2차 항체 유래가 달라야 합니다.

   왜냐하면, 3차 항체가 1차와 2차 모두를 잡게 되어 시그날이 항원 농도에 상관없이 굉장히 높게 나올 것 같습니다.

2. 1차, 2차를 같은 종으로 사용하시려면, 우선은 인지하는 epitope가 달라야 하고, 이론적으로 epitope가 거리가 있어서 1차항체와 반응한 부위와 간섭이 없어야 합니다.  그리고, 3차 항체를 사용하지 않도록 2차항체에 신호를 낼 수 있는 항체등이 conjugation된 걸 사용해야 합니다.

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