실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
3t3-L1 subculture 후 cell shape이 이상해요
레벨1 ssh_cell (대학생)
안녕하세요. 기존에 HT-29 cell을 하다가 이번에 3T3-L1 으로 실험을 하게 된 대학원생입니다...
3T3-L1은 처음이라서 어려움이 많은데요..... perti dish에 깔려있는 3t3-L1을 subculture 하는데, 항상 subculture 하고나면 cell shape이 좀 깨지거나 cell들이 하루 이상 되어도 바닥에 붙지 않더라구요....
subculture 하는 방법이 잘못 된건지.. 무엇이 문제일까요?
아래의 method가 제가 하고있는 subculture 순서 입니다.
'기존 media 제거 후 가볍게 washing → trypsin/EDTA 4분 처리 → media 넣고 살짝 pipetting 후 15ml conical tube에 옮긴 다음 centrifuge (1100rpm / 3분) → supernatant 제거 후 media 넣어서 pellet 풀고 plate로 옮기기"
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