[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
물리적 거리두기 실천
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
LABox-과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Cell Biology > Cell Culture
조회 461  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 3t3-L1 subculture 후 cell shape이 이상해요
알ssh_cell(대학생)  |  02.27 17:10

안녕하세요. 기존에 HT-29 cell을 하다가 이번에 3T3-L1 으로 실험을 하게 된 대학원생입니다...

3T3-L1은 처음이라서 어려움이 많은데요..... perti dish에 깔려있는 3t3-L1을 subculture 하는데, 항상 subculture 하고나면 cell shape이 좀 깨지거나 cell들이 하루 이상 되어도 바닥에 붙지 않더라구요.... 

subculture 하는 방법이 잘못 된건지.. 무엇이 문제일까요?

 

아래의 method가 제가 하고있는 subculture 순서 입니다. 

'기존 media 제거 후 가볍게 washing → trypsin/EDTA 4분 처리 → media 넣고 살짝 pipetting 후 15ml conical tube에 옮긴 다음 centrifuge (1100rpm / 3분) → supernatant 제거 후 media 넣어서 pellet 풀고 plate로 옮기기" 

#3t3-L1
 
#subculture
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
앞다리포르말린  |  02.28 17:29  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

3T3-L1은 부착세포이기 때문에 petri-dish에서 키우는 것이 아니라 cell culture dish에서 키우셔야 합니다. culture plate 문제인듯 하니 바꿔서 seeding해보세요

알ssh_cell  |  03.10 10:47  

제가 정보를 자세히 적지 않았는데,

사용하고 있는 petri dish가 cell culture petri dish입니다!ㅠㅠ

 

현재 사용하고 있는 complete media가

일부 받아서 쓰고 있는 media인데, Exp가 조금 오래되었더라구요.

혹시 media 문제일까요>? 

 

알청개굴개굴  |  03.12 11:11  

몇 파이 디시에 메디아를 얼마나 넣으시나요? 차이점이 있다면 트립신-EDTA를 트리트하는 시간이 좀 긴 것 같네요. 저는 2-3분 냅뒀었는데 1분만 해도 떼어진다고 해서 줄였습니다.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
케이비티 케이비티
Stirrer, Dry Bath, Shaking Incubator, Thermo Shaker 등 다양한 제품.. (6.31까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
6/6  좌우
55,70053,000
195,700186,000
50,40047,900
60,70057,700
126,900120,600
92,30087,700
47,20044,900
86,90082,600
153,100145,500
111,900106,400
130,400123,900
51,40048,900
276,800263,000
67,10063,800
272,100258,500
139,400132,500
339,000322,100
1,676,8001,593,000
87,40083,100
111,300105,800
80,40076,400
154,700147,000
62,00058,900
121,800115,800
최근등록   더보기 >
기기 차이   04.04
hemolysis activity의 positive strain이 궁금합니다.   04.04
미세조류(클로렐라) 배양 시 탄소원 문의   04.04
elisa   04.04
미생물 배양, 단백질 정제 화학지식?   04.04
hiv가 하루에 감염/제거하는 CD4+세포수, CD4+세포가 제거하는 hiv수   04.03
NI-NTA resin 공기 노출시 아예 사용못하나요?   04.03
프라이머 디자인에 대해서 질문드립니다.   04.03
Internal control이 exogenous로 따로 넣어줄 경우   04.03
PCR smearing 현상ㅠㅠ   04.03
국립암센터
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크