실험 Q&A Chemical biology > Analysis
HPLC/FLD 이용한 벤조피렌 실험에서 Internal standard인 3-methylcholanthrene이 회수가 안됩니다.... 도와주세요 ㅠㅠ
레벨1 멋있다 (대학원생)
안녕하세요
이번에 HPLC/FLD로 벤조피렌 분석을 하게 되었는데 Internal standard인 3-methylcholanthrene(3-MC)가 회수가 안되네요...
Standard인 벤조피렌과 Internal standard인 3-MC를 Mixter solution을 Acetonitrile(ACN)을 이용해 제조 하였고 solution만 기기에 찍었을때는 피크가 잘나옵니다. 컬럼은 c18계열을 컬럼을 썻습니다.
하지만 전처리 과정을 거치면 벤조피렌은 피크가 나오는데, 3-MC가 회수가 안되네요, 50ppb 농도로 찍으면 피크 area가 130정도 나오는데, 전처리 과정을 거치니깐 하나도 안뜨거나 한자리수의 area가 나옵니다.
샘플 추출없이
hexane 150mL + standard solution 1mL을 rotary evaporator 시킨후
hexane 5mL로 녹이고 Florisil cartridge로 정제과정을 거치고
hexane:DCM(3:1)을 10mL 추가로 흘려준후
질소농축하여 전부 날리고, 최종ACN 1mL로 녹인후 필터하여 HPLC를 찍어도
벤조피렌 피크만 뜨고, 3-MC피크는 뜨지 않습니다. 농도를 높여봐도 나오지 않네요...
다른 논문이나 보고서보면 다 잘나오는데 왜 저만 안나오는 것인가요...?ㅠㅠㅠㅠㅠㅠ
이리저리 다해봐도 나오지 않아 답답한데 제발 도와주십쇼 ㅠㅠ
부탁드리겠습니다...
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