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1. 1.5ml tube 1개 추출하여 몇 ul에 녹이고 ul당 어느정도 gDNA가 나오나요?
2. 1.5ml에 균사를 어느정도 모아서 추출하나요?
3. gDNA 사용 용도가 어떻게 되나요?
4. 전기영동으로 gDNA를 확인했나요?
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레벨4
금맘
(대학원생)
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20.02.27 12:07
1. 1.5ml tube에 70㎕에 녹이고 농도는 낮은경우 1.4까지도 나옵니다.
2. 1.5ml tube의 1/3 또는 2/3정도 균사가 차도록 넣습니다.
3. PCR하여 genetic diversity를 보기 위함입니다.
4. PCR 후에 전기영동으로 확인했을때 증폭이 되는것도있고 안되는것도 있었습니다. 농도와는 상관없이 나왔습니다
1. 1.5ml tube에 70㎕에 녹이고 농도는 낮은경우 1.4까지도 나옵니다.
: ml당 몇 ug정도인가요?
2. 1.5ml tube의 1/3 또는 2/3정도 균사가 차도록 넣습니다.
: 균체 집균하듯이 원심분리 후 어느정도 균사양인가요?
4. PCR 후에 전기영동으로 확인했을때 증폭이 되는것도있고 안되는것도 있었습니다. 농도와는 상관없이 나왔습니다
: gDNA 전기영동은 안했나요?
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레벨4
금맘
(대학원생)
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20.02.27 17:06
1. 1.4ng/µl 나오니까 ml당 1400ng 정도 나옵니다.
2. 균체 수집 후 동결건조하여 파쇄하면 1/3정도 차고 거기서 바로 buffer 를 첨가합니다.
4.gDNA 전기영동은 하지 않았습니다
이정도 양이면 거의 추출이 되지 않았습니다.
균사 파쇄 후 바로 kit의 lysis buffer를 넣고 실험하나요?
lysis 할 때 온도를 몇도까지 올려서 실험 하나요?
우선 균사양을 많이 줄여서 실험해야 합니다.