실험 Q&A Immunology > Immunofluorescence
IHC staining이요!
레벨2 피곤쓰요 (대학생)
안녕하세요!
항상 실험 궁금한 것에 대해 답변을 잘해주셔서 감사합니다!
제가 이번에 여쭤볼 건.. mouse brain을 cryosection 해서 IHC (dab staining), IF 를 진행할 때 antigen retrieval이 필요한지 입니다.
brain의 경우, perfusion 한 다음 4% PFA에 담궜다가 30% sucrose로 옮긴 다음 OCT에 고정시켜 cryosection (두께 30 um)을 진행합니다.
이렇게 얻은 section(serial section으로 well 당 6 조각) 을 가지고 free floating 방법으로 IHC , IF 을 진행하게 되는데, 혹시 antigen retrieval을 해도 되나요?
여태까지 안하고 했는데, 가끔 staining이 듬성듬성 잘 안될 때가 있어서요ㅠ 듬성듬성 안된 조각들은 다른 well의 section에서도 똑같이 안되있더라구요ㅠ (똑같은 부분) 칼날은 문제 없는 것 같아서.. 그래서 PFA에 의한 antigen masking 때문은 아닐까 생각합니다ㅠ
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