실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > mRNA Analysis
primer efficiency 와 melting curve
레벨3 셀살리기 (대학원생)
리비워가 the primers efficiency 테스트 했는지 물어 봤는데요.
검색을 해보니 starndard curve 를 확인들 하시드라고요
저희 랩은 melting curve 에서 피크가 하나만 나오면 잘 짜진 프라이머라고 믿고 쓰는데요. ^^;;
사실 제가 피시알의 기본이 많이 모자라서 ㅠ 찾아도 감이 없구 지금 저희랩은 피시알 잘하는 사람이 없어서... 여기 분들에게 문의해요.앞서 감사드려요.
1. melting curve 로 충분 할까요, standard curve 그려서 내야할까요 ?
2. 멜팅커브로 해도 된다면, 저희가 보는건 one peak 인데... 혹시 온도는 상관이 없는지 갑자기 궁금해졌습니다. gene들의 Tm 온도의 차이가 있습니다.
2. 제가 확인했던 Melting curve 를 기계에서 그대로 그림으로 리포트해서 보여주고 이렇게 확인 했다 해도 될까요 ?
3. melting curve 는 프라이머만 (단백질 없이) 찍은걸 보여주는건가요, 아니면 제 모든 쌤플의 멜팅컬브를 보여주는건가요? )
4. 혹 standard curve 를 그려야 한다면.. 어떻게 그리는건지 알려주실수있나요? 여기저기 유툽으로 그리는 방법및 값을 찾으니 뭔가 복잡하고, 너무 옛날 방법같아서요.
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