실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
non-reducing sds-PAGE loading buffer제작
레벨1 ver18 (대학생)
안녕하세요!!
non-reducing sds-PAGE loading buffer를 만드는방법을 몰라서 아시는 분께 조언을 얻고자합니다!!
b mercaptoethanol이 free인 loading buffer를 사용해야 non-reducing조건으로 sds-page 를 할 수 있다고 알고 있는데요. 직접 만들어보지 못해서요..
일반 loading buffer 제작은 이렇게 들었습니다.
For 25ml:
1.47 g Tris-HCl, 1.5 g SDS, 1.2 ml Glycerol 를 섞어서 40 ºC 에서 녹임
2.25 ml 2-Mercaptoethanol, 7.5 mg Bromophenol blue 첨가 후
6.8 pH 확인. ddH2O 첨가(25 ml까지)
Aliquot, -20 ºC 보관
여기서 b mercaptoethanol만 제외시키면 되나요? 아니면 다른 protocol이 있을까요?
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