실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
qPCR meltcurve 관련 질문드립니다
레벨1 실험새싹ㄱ (대학생)
안녕하세요 석사과정중인 대학원생입니다.
qPCR하는데 궁금증이 생겨서 글을 남기게 되었습니다.
Appliedbiosystems의 steponeplus 장비와 sybergreen을 사용하고있습니다.
meltcurve가 그려질 때 peak는 1개가 나와야 하는것으로 알고 있는데요,
제가 실험한 결과는 사진과 같이 peak는 타겟 당 하나씩 나오는 것이 맞지만 tm값이 차이가 납니다.
프라이머를 다른 것을 사용해보기도 하고, Tm값에 변화를 주기도 했지만 항상 같은 양상의 peak가 떠서요,
혹시 문제가 있다면 trouble shooting을 어떤 방법을 시도해 보는 것이 좋을지, 혹은 이 실험결과에 잘못된 부분이 없는건지 궁금해서 글을 남기게 되었습니다.
도움 부탁드리겠습니다.
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