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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 semi-dry 방식의 western blot 시에 뚜껑 soaking 관련,,
알연구잘하자(대학생)  |  02.16 17:05

안녕하세요

semi-dry 방식으로 웨스턴 블랏을 진행하는 실험 초보입니다.

저희 실험실에서는 3m paper과 pvdf를 깔기 전에

기기 본체와, 뚜껑에 1X transfer buffer를 부어 적시는데 

뚜껑도 부어 적시는 이유가 뭘까요..?

그리고 혹시 뚜껑에 transfer buffer를 부어 적시지 않았더라도

본체와, 3m paper, pvdf 모두 transfer buffer에 적셨더라면 blot이 옮겨지는데 문제가 없을까요?

답변 감사드립니다.

#웨스턴블랏
 
#western blot
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개구리아이스티  |  02.17 15:34  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

paper, pvdf, gel 모두 10분 이상 transfer buffer에 담궜다가

그대로 transfer 기기에 순서대로 올리고 진행하면 됩니다.

따로 기기에 buffer 안부어도 잘 되고 이상없습니다.

transfer를 한시간이상 진행할 경우 마르는 것을 방지하기 위해 buffer를 따로 넣는 경우도 있지만 웬만하면 transfer할때 시간은 1시간 이하로 하고 voltage를 조절하는 방법으로 컨디션 조절해도 실험 잘 됩니다.

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