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질문 FACS reagents 질문입니다.
올챙이Arkadis(대학생)  |  02.14 17:32

FACS를 사용하는 실험을 준비중입니다.  Isolation of Mouse Hair Follicle Bulge Stem Cells and Their Functional Analysis in a Reconstitution Assay. 라는 논문을 base로 쓰고 있습니다.

그런데 이 논문에서 materials에서는 CD49f-PE와 CD34-FITC를 준비하라고 했는데 methods에서는 CD49f-FITC와 CD34-PE를 사용한다고 하더군요.

1. 어느쪽을 따르는 것이 맞나요?

+) Materials에서 HFC isolation reagent 항목에 SMEM이란 것이 있던데 이건 또 뭔가요?

#FACS
 
#SMEM
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리지나가는사람  |  02.15 12:07  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

선생님 안녕하세요 ^^ 선생님이 어떤 말씀을 하시려고하는지 이해는 됐습니다.

간단하게 답변 드리고자합니다.

먼저, 선생님께서 사용하셔야 될 Ab 는 CD45f 와 CD34 입니다.

여기서, 선생님께서 생각하셔야될것이 파장입니다.

CD45f 및 CD34 의 파장을 FITC 로 써야되느냐 PE 로 써야하느냐 문젠데요~

1) 레퍼런스가 조금 잘못된 것 같은데요~ 둘다 사용하셔도 됩니다.
   하지만 논문 출처에 나온 Cat.no 를 따르세요~ 즉, CD49F-PE, CD34-FITC

2) 그리고, 혹시나 하여 각 Ab의 data seet 에 보면 Em, Ex 파장이 있습니다.
   각 파장이 잘 분리되어있는지 확인하시길 바랍니다.

3) 그리고, 만약에 나중에 이 두 Ab 외에 선생님께서 추후에 사용해야될
    Ab 조합도 역시 고려하셔야합니다.

   만약 나중에 FITC, PE 를 제외한 PerCP, APC, PEcy7, APCcy7, Pacific blue 를 사용하시게 된다면 선생님께서 사용하시고자하는 파장이 위 빨간색으로 표시된 쪽에 없다면 FITC 와 PE 둘중 한가지 파장으로 사용하셔야되며, 기존에 FIIC 와 PE 파장에 쓰실려고했던 Ab 를 빨간색 중에 한가지로 대체하여 사용하셔야합니다 ^^
 

올챙이Arkadis  |  02.18 10:11  

답변내용이 큰 도움이 되었습니다. 감사합니다.

그리고 혹시 가능하시다면 SMEM과 DMEM이나 EMEM의 차이를 알려주실 수 있나요?

SMEM을 사용하라고 했는데 다른 MEM들과의 차이를 모르겠습니다. 찾아봐도 나오지 않더군요..

DMEM, EMEM, alpha-MEM 등은 검색결과에 나오는데 SMEM만 유독 나오지 않더라구요... 알려주시면 감사하겠습니다.

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