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 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
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질문 GST Purification후 BCA assay 문제
알수바기(대학생)  |  02.14 16:43

안녕하세요

GST Purification후에 단백질 정량을 위해 BCA assay를 진행 하였는데

control를 맞출려고 2mL BCA buffer에 100ul Glutathione Elution buffer를 넣으니 색이 바로 변하더라구요... 562nm에서 측정해봐도 Abs값이 변동이 심해서 control도 안 맞춰 지고... 정제한 단백질의 Abs도 이상하게 나옵니다..

Elution buffer에는 Glutathione 과 50mM Tris pH8.5가 들어 있는데 혹시 이것들이 문제 인가요???

다른 정량법을 찾아야 하는 것인가요?? 

혹시 Glutathione이 문제이면 Centricon으로 제거해야 하나요???

#protein
 
#purification
 
#BCA
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  02.14 16:53  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

BCA assay에서 아래 표와 같은 물질들이 방해를 줍니다.

UF로 제거를 해서 측정 하는 것이 좋을 듯 합니다.

upload_image

 

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