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질문 HepG2에서 FFA유도 지방간 유도 실험
알그냥살어(일반인)  |  02.11 17:56

안녕하세요

HepG2 세포에서 FFA를 처리해서 지방간유도 하는 실험중입니다

1mM FFA(oleic acid 2:palmitic acid 1), 24시간 처리후 Oil Red O 염색을 했을때는

유도가 잘 되었습니다.

 

근데 qPCR을 해서 FAS나 SREBP1을 확인해보면

FFA처리군이 무처리군(NOR)보다 낮게 나와서 고민입니다.

NOR 1이면 FFA는 0.5~0.6이 나옵니다.

 

처리시간의 문제인지, starvation을 안해서인지....... 정말 모르겠습니다.ㅠ

조언부탁드립니다.

---------------------------

전에 동물실험했을때에도 저는 NOR군이 HFD군보다 높게나왔었는데......

같은 문제일지....... 답변부탁드립니다

 

 

 

#NAFLD
 
#FFA
 
#HepG2
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
궁금이  |  02.12 12:54   

저도 같은 패턴인데 아직도 해결 못하고 있어요 ㅠ 해결되셨으면 어디가 문제인지 공유 부탁드립니다

랩가이드  |  02.14 10:08   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

안녕하세요. 

 

저도 대학원 기간때, 지방간 실험을 한적이 있어서 질문에 참고가 되었으면 합니다. 
 

저의 생각부터 말하면 Oil-Red O 로 염색했을때는 지방 방울 축적이 무처리군 보다 높은 이유는, 베지에 첨가되어 있는 지방이 많이 있기 때문이고요, qPCR에서 SREBP1 등의 발현이 NOR보다 낮은 이유는 유전자 발현을 통해서 지방 축적을 나타낼 필요가 없어서가 아닌가 합니다. 

참고로 UPR(Unfolded protein response : 소포체 스트레스와 관련된)막 단백질과 SREBP1 막 단백질은 SP1/2에 의해서 활성화 됩니다. 

결론적으로 두개의 축적 경로가 다르다고 생각이 되네요. 

이만 도움이 되었으면 합니다. 

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