실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
발현벡터로 클로닝 질문있습니다.
레벨5 해징 (대학원생)
안녕하세요. 세팅실험실 석사과정 학생입니다.
물어볼 사람이 마땅치가 않아서 질문 드립니다 ㅠㅠ
현재 클로닝을 하는데 클로닝벡터에 클로닝하여 sequencing까지 여차저차 많은 시행착오 끝에 했습니다.
이제 발현벡터로 서브 클로닝을 하고 싶은데 TA 클로닝을 중간에 거쳐야 하는지 고민이 되어 질문 드립니다.
pET28a 벡터엔 있고 제 insert에는 없는 제한효소 사이트가 BamH1, Eag1, EcoR1, Nco1, Sac1, Sal1, xho1 입니다. 제가 사용한 벡터는 pBluescript 벡터(Hindlll, Pst1으로 잘라서 insert 넣었습니다)인데 insert 주위에 해당 제한효소 사이트가 없어서 TA 클로닝 후 pET28-a로 옮겨야 할까요?
저희 실험실에 있는 키트는 MGMED의 TOPO blunt-end cloning kit 입니다. 이 키트가 TA클로닝을 위한 키트가 맞을까요??
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