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레벨2
연구원3
(과기인)
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20.02.06 11:26
좀 찾아봤는데
1. 발현 온도를 낮춰본다
2. 벡터를 바꾸어 본다
3. 컨스트럭트의 위치를 바꾸어 본다
4. binding partner가 있을 경우 동시발현을 할 수 있을지 검토
5. chaperon 등을 같이 과발현 하면 효과가 있을 수도 있다.
6. 대장균을 포기하고 다른 호스트로 옮겨간다.
이게 맞나요..? 이외에 더있나요??
발현은 되는데 반응이 안되는 것인가요 아니면 발현이 안되는 건가요?
codon bias를 확인해 보세요.
대장균에서 잘 사용하지 않는 codon이 많은 유전자는 발현이 거의 안됩니다.
또한 turn over가 짧아서 발현되면서 즉시 degradation될 수도 있고 대장균에서 toxic해서 발현이 안되는 경우도 많습니다.
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레벨2
연구원3
(과기인)
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20.02.06 14:12
re : speed
발현은 되는데 반응이 안가요..
지금 같은 균주로 2가지 물질에 대해서 반응시키는데
즉,
1. A -> B
2. C -> D
그런데, 이 두가지 반응의 메커니즘은 같아요. 어느단계에서 OH가 빠지고, 이중결합이 꺠지고~이런거요.
근데 1번 반응은 잘갑니다.
그러나 2번 반응이 안가요. 이 A와 C 물질의 차이는 OH기 하나인데
반응성이 극명하게 갈려서요..
여튼, 그러면 발현량을 더 늘리면 되지 않을까..라고 생각하고 있었습니다.