실험 Q&A Cell Biology > Viability
MTT 실험시 시딩하는 세포의 수에 대해서 궁금합니다!
레벨1 apple693 (대학생)
현재 세포 실험에 대해서 공부하기 시작한 학부생입니다. MTT assay에 대해서 공부하던 중 의문점이 생겨서 글을 올립니다.
1. 세포마다 MTT assay를 하기위해 well에 seeding하는 세포의 수가 달랐습니다. 세포마다 크기가 다르기 때문에 일정 confluency를 맞추려고 세포의 수를 다르게 하는 것인가요??
2. 그렇다면 seeding 하는 하루 배양 후 80~100%의 confluency가 되게끔 맞추는 것인가요??
3. 80~100%의 confluency를 맞추지 않은 상태 (약 50% 정도)에서 sample을 처리한다면, sample에 의해 세포가 죽어서 뜨는 경우와 죽지는 않았으나 세포의 증식자체가 저해되는 경우가 발생할 수 있다고 생각합니다. 이런 경우에는 어떻게 결과 분석을 하여야하는지 궁금합니다.
4. 실험은 한가지 변수를 제외한 모든 조건을 동일시 한 상태에서 진행하는 것으로 배웠습니다. 하지만 3. 실험의 경우 제 생각으로는 두 가지의 변수(세포 독성, 세포 증식저해)가 존재하다고 생각되는데 잘못된 실험 조건일까요??
선배님들 도와주세요.... 아무리 생각해도 잘 모르겠습니다. ㅠㅠㅠ
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