실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
어느 단계인지가 중요합니다.
가령 cell harvest 단계라면 rpm이 낮아도 cell만 다 회수할 수 있다면 5,000 rpm 이든 3,000 rpm 이든 상관 없습니다.
만일 Sol 1, 2 , 3 까지 처리한 후의 원심분리라면 rpm 을 낮출 경우 ppt가 잘 안되서 plasmid purity가 크게 떨어질 수도 있습니다.
이런 경우에는 아예 E-tube에 분주해서 13,000 - 1,5000 rpm으로 돌리는 것도 좋은 대체방법입니다.
resin을 원심분리할때도 rpm이 낮아지면 resin에 washing buffer 성분이 완전히 제거되지 않아서 plasmid DNA 순도가 낮아질 수 있습니다.
-
레벨1
esprit33
(대학원생)
-
20.02.06 10:30
PW로 wash하는 step과 마지막 elution step에서 5000rpm으로 돌려야한다고 되어 있네요. midi kit가 50ml conical tube와 맞게 설계되어있어서 ep tube로 옮겨서 centri는 못 할 것 같습니다..ㅠㅠ
마지막 2 step이라면 rpm을 낮춰도 무방합니다.
wash 후에는 잘 건조 후 elution하세요.
-
레벨1
esprit33
(대학원생)
-
20.02.06 13:37
네 알겠습니다. 감사합니다~~!!