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질문 endogenous interaction 잘 보이시나요?
올챙이endo  | 2008.11.10 12:07
IP를 하는데 endogenous level에서의 protein-protein interaction을 잡아내려고 합니다.
endogenous한 protein level이 적다보니 cell도, antibody도, 많이 사용하는데요..
endogenous interaction을 잡아내는게 이리 힘든건가요 ㅠㅠ??
protein양은 6mg까지 해보고, antibody는 6ug/30ul로 넣는데.. 안잡힙니다 ㅠㅠ
endogenous interaction 확인하신분들 어떻게 하셨나요 ?
#endogenous interaction
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리ryan  |  2008.11.10   
cytosol에서 direct interaction하는 protein이라면 endo level에서도 기본적인 condition으로 잘 잡힙니다만,
그외의 경우라면 우선 transfection하여 interaction 유무를 먼저 확인하는 것이 좋을 듯 합니다.
endo  |  2008.11.10    
ectopic condition으로 제가 transfection해서 interaction하는건 잡았거든요..
endogenous 가 영 말썽이네요 ㅠㅠ
개구리ryan  |  2008.11.10   
그렇다면 사용하시는 antibody가 protein의 어느 부위를 잡는지도 확인할 필요성이 있습니다.
protein이 interaction하는 부위를 인지하다면 interaction을 확인하기 힘들죠.

다른 부위를 인지하는 antibody를 찾아보시는 것도 하나의 방법입니다.
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