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실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
Gateway cloning BP reaction 관련 질문입니다
레벨3 soonlok (대학생)
지금 원하는 유전자를 클로닝하기 위해서
BP reaction 준비중입니다.
그런데 타겟 유전자가 처음 PCR단계에서는 계속 확인이되는데
pcr product를 가지고 2nd pcr 돌리거나 gel extraction 한거로 2nd pcr을
돌리면 밴드가 사라지고 다이머만 확인이 됩니다
그래서 그냥 처음 pcr한 product를 가지고
bp reaction을 진행하고자하는데 상관없을까요??
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답변 1
1st pcr product의 농도만 낮지 않다면 굳이 2nd pcr을 진행하지 않으셔도 무관합니다. 개인적인 경험으로는 50ng/ul 이상이면 크게 문제되지 않는 것 같습니다.
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