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질문 균주 분양후 배양방법에 대한 절차에 대해 궁금합니다!
알하나도몰라(일반인)  |  01.20 10:22

안녕하세요?

이번에 대한약전에 나온 표준균주 6종에 대한 master stock과 working stock을 만드려고 합니다.

지금까지는 0.1mL에 정해진 CFU를 가진 시판용 균주를 구매해 사용해왔었습니다. 

이와 관련해서 궁금한 점이 있는데, 제가 이쪽 관련해서는 기본적으로 아는 지식이 없어서 자세히 알려주시면 감사합니다..

 

1. 보통 passage 2~3인 시판용 균주가 아닌 균주 은행에서 분양받은다음에 계대를 통해 stock을 만들어야 하는 이유는??  (passge5를 넘으면 안된다는것은 알고 있습니다. 그런데 시판용 균주도 정확한 CFU가 정해져있기 때문에 시험하기에 편리할거 같아서 질문드립니다.
 

2. 균주은행에서 분양받을 시, 계대방법 및 stock만드는 방법, CFU맞추는 방법등의 프로토콜을 제공해 주나요???(아니라면 균주은행에서 어떠한 정보를 받는건지 궁금합니다.)

3.  대략적인 master stock과 working stock 만드는 방법에 대해서 설명해주셨으면 합니다. 사용할 균주는 다음 6종입니다.

   staphylococcus aureus / Pseudomonas aeruginosa / Clostridium sporogenes

   Bacillus subtilis / Candida albicans / Aspergillus brasiliensis

 

제가 기본적인 지식이 없는 상태라 질문에 두서가 없을 수 있는데 양해부탁드립니다.

많은 도움 부탁드립니다!!

   
 

#표준균주
 
#분양
 
#배양
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
꽃개구리Applied_Microbe  |  01.20 14:45  

상업적으로 판매하는 정량균주와 정성균주를 사용하셔도 상관없을듯합니다. 꼭 균주은행에서 분양받아서 사용해야하는건 아니에요

장기간 계대배양 과정에서 돌연변이가 되는 것 때문에 그러는것 같은데요....

액상배양 full growth 상태에서의 CFU 값을 확인하고 그걸 glycerol 10%~20%가 되도록 혼합하여 냉동저장하고. . .   실험에 사용할 CFU로 배양배지나, PBS, 생리식염수로 희석해서 보정한 다음에 그걸  glycerol 10%~20%가 되도록 혼합하여 냉동저장하면 될 것 같네요... 그대신 정량균주는 노무 오래 보관하시면 안될 것 같네요

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