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1. 배양액을 A600에서 흡광도를 측정하여 ml 당 OD값을 우선 측정합니다.
2. 배양액을 희석 배수 별로 plate에 spreading하여 나온 colony를 계산하여
ml 당 cfu를 계산합니다.
1과 2를 통해서 cfu/ml을 구하여 접종하기 원하는 균수를 배지에 접종가능
합니다.
10^5의 균수를 접종하려면 사용하려는 배양액의 균수를 알아야 접종 가능합니다.
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레벨6
Applied_Microbe
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20.01.20 07:08
보유균주를 full growth 상태에서 멸균된 PBS나 생리식염수를 이용해서 serial dilution 합니다.
그래서 직선이 나오는 구간까지 분산그래프에서 확인 후 검량선을 작성합니다.
그리고 R^2 값이 0.99이상 나오는 것을 찾으세용
그렇게 하면 흡광값에 따른 CFU 값이 나옵니다. 이 흡광값에 따른 검량선을 이용하시면 되는데.... 아래 흡광값은 Microplate reader로 한거라 3 point 뿐인데요... 석영큐벳으로 하면 5point 정도 나옵니다. 이 값을 이용해서 희석비율을 정해서 접종하면 10^5 cells/ml을 맞출 수 있습니다.
님이 가지고 있는 균주의 흡광값과 그에 해당하는 균주의 CFU를 알아야 배양액에 어느정도 비율로 넣어야 하는지 확인되겠죠