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질문 총균수 셀 때 질문이요
알미린이(대학원생)  |  01.19 11:24

총 균수 셀 때 초기접종했을 때의 균도 관여하나요?
 

1.균수 세는 법좀 알려주세요! 

2. 10^5되게 접종을 하려고 하면 9ml broth에 균을 몇 마이크로 접종을하면되나요? 

#균세는법
 
#총균수
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  01.19 16:51  

1. 배양액을 A600에서 흡광도를 측정하여 ml 당 OD값을 우선 측정합니다.

2. 배양액을 희석 배수 별로 plate에 spreading하여 나온 colony를 계산하여

ml 당 cfu를 계산합니다.

1과 2를 통해서 cfu/ml을 구하여 접종하기 원하는 균수를 배지에 접종가능

합니다.

10^5의 균수를 접종하려면 사용하려는 배양액의 균수를 알아야 접종 가능합니다.

꽃개구리Applied_Microbe  |  01.20 07:08  

보유균주를 full growth 상태에서 멸균된 PBS나 생리식염수를 이용해서 serial dilution 합니다. 

그래서 직선이 나오는 구간까지 분산그래프에서 확인 후 검량선을 작성합니다.

그리고 R^2 값이 0.99이상 나오는 것을 찾으세용

그렇게 하면 흡광값에 따른 CFU 값이 나옵니다.  이 흡광값에 따른 검량선을 이용하시면 되는데.... 아래 흡광값은 Microplate reader로 한거라 3 point 뿐인데요... 석영큐벳으로 하면 5point 정도 나옵니다. 이 값을 이용해서 희석비율을 정해서 접종하면 10^5 cells/ml을 맞출 수 있습니다.

님이 가지고 있는 균주의 흡광값과 그에 해당하는 균주의 CFU를 알아야 배양액에 어느정도 비율로 넣어야 하는지 확인되겠죠

upload_image

 

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