[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
https://www.ibric.org/myboard/list.php?Board=news&PARA3=54
스폰서배너광고 안내  배너1
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > Purification/Isolation
조회 1364  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 DNA 농도관련
알생물뉴비(대학생)  |  01.16 18:31

제가 어떤 plasmid vector를 처음 받아서 stbl3 cp cell에 transformation 한 뒤 colony를 picking하여 3ml LB media에 하루 동안 배양한 뒤 2ml prep을 하였더니 200ug/ul 정도가 나왔습니다. 그래서 남은 배양액으로 stock을 만들고 얼마 지난뒤 다시 plasmid vector를 얻기 위해서 stock을 3ml media에 풀고 2.8ml을 prep 하였더니 60ug/ul 정도가 나왔습니다.

그래서 다른 vector에도 똑같은 방법으로 진행하였더니 똑같은 결과가 나왔습니다

이유를 곰곰히 생각을 해보았는데,

stock을 풀때 amp plate에서 picking 하는 과정을 거치지 않고 LB에서 바로 prep을 하였기 때문에 다른 잡균들이 성장을 방해하여서 양이 적었는지가 제 생각인데 혹시 다른 이유를 좀 알 수 있을까요?

#DNA prep
 
#E.coli stock
 
#DNA ng/ul
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  01.16 18:38  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

plasmid 분리 시 농도는 TF 직후 배양한 균에서 가장 많이 나옵니다.

이 후 배양한 균에서는 1차 배양한 균보다 plasmid 농도가 낮아져 일정하게

유지 됩니다.

정상적인 상황입니다.

따라서 plasmid를 많이 얻고 싶으면 TF 한 colony를 배양해서 plasmid를

분리하면 됩니다.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
코람바이오텍 코람바이오텍
[OriGene] IHC Reagents, shRNA, CRISPR, Proteins, Lentivirus.. (4.27까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
Eppendorf New 25mL Conical Tubes : 혁신적인 디자인과 다양하고 편리한 사용 (4.1까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
4/6  좌우
867,100824,000
92,80088,000
242,000230,000
71,30068,000
316,000300,000
522,300496,000
102,30097,000
79,70076,000
90,60086,000
153,000145,000
691,800657,000
404,600384,000
239,800228,000
140,100133,000
603,600573,000
199,100189,000
147,600140,000
225,200214,000
119,600114,000
625,100594,000
272,300259,000
158,400150,000
121,100115,000
374,800356,000
최근등록   더보기 >
코로나19 같은 바이러스 관련 실험문의입니다!!(급합니다ㅜ)   02.22
세포가 오염돼서 죽은 거 같아요   02.21
mouse 실험에 적당한 전기자극은 어느정도일까요?   02.21
Native PAGE 기초적인 질문 드립니다   02.21
이온강도   02.21
wound에서 scar가 된 후의 cytokine의 변화   02.21
폐액 버리는거 질문이요   02.21
웨스턴 진행 시   02.21
PCR시 두개의 밴드가 뜹니다ㅠㅠ   02.21
bacillus subtilis 생장곡선   02.21
에스엘에스바이오
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아