실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
TA cloning에 대해서 궁금한 것이 있습니다.
레벨3 레비나스 (대학생)
안녕하세요.
저는 학부생으로서 자대 랩실에서 실험을 배우고 있습니다.
TA cloning에 대해 궁금한 것이 있어서 여쭤보고 싶습니다.
제가 했던 실험은 T-vector에 insert를 넣은 후 pcr 및 transformation을 했으며
colony pcr을 통해 insert가 T-vector에 ligation이 잘 된 것을 확인할 수 있었는데요
궁금한 것이 2가지 있습니다.
1. T-vector에 insert가 거꾸로 들어가는 것은 실험에 별로 영향을 미치지 않나요? T-vector에 insert가 거꾸로 들어가게 되면 생기는 현상에 대해 알고 싶습니다.
2. colony pcr을 했을 때 insert 보다 size가 큰 것을 보고 ligation이 제대로 되었다는 것을 확인할 수 있었는데요, colony pcr을 할 때 사용하는 primer는 insert보다 앞 쪽에 붙는(T-vector 쪽) 것으로 design을 해야하는 것 인가요?
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