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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
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질문 prep 후 DNA purity 확인 방법
알2020(일반인)  |  01.07 23:38

안녕하세요. DNA prep purity에 대해 궁금한것이 있어 질문 올립니다.

답변해주신다면 감사하겠습니다.  

 

1.  DNA mini prep 후 prep 한 vector을 가지고 RE를 처리하지않고

  DNA에 6X dye만 넣어 agarose gel 에 전기영동 해보았습니다.

  pattern 확인 결과 3개의 band ( nick, linear, supercoiled)를 확인했습니다.

  DNA prep 의 purity가 좋으면 band가 3개 있는것이 맞나요?

  band 가 1개 있는 것이 맞나요? (uncut 일 때, RE 처리하지 않았을 때)

 

2. mini prep 후 nano drop를 통해 농도를 측정한 결과 260/230 ratio 가

   1.6~1.7 사이로 나오는데, prep 과정 중 어느 부분에서 문제가 있을까요..

 ( wash 진행 후 공회전을 통해 충분히 wash buffer는 제거했다고 생각합니다. )

 ( elution buffer도 매번 새로운 DW로 사용하였습니다.)

 

지식을 나누어 주신다면 감사하겠습니다.

모두들 새해 복 많이 받으세요.

 

 

#DNA prep
 
#purity
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  01.08 00:09  

특정 물질의 purity라는 것은 해당 물질 외의 물질이 얼마나 포함되어 있는가의

문제입니다.

plasmid prep.후 3가지 type의 plasmid 모두 plasmid이기 때문에 plasmid purity와

관계없습니다.

그리고 너무 광학적인 순도 확인에 민감할 필요는 없습니다.

plasmid는 prep. 후 전기영동에서 깨끗하게 보이고 RE로 잘 잘린다면 아무런

문제가 없는 plasmid입니다.

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