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질문 standard curve
올챙이tape(대학원생)  |  2019.12.19 13:20

upload_image

제가 standard curve를 그렸는데 이렇게 나오는게 맞나요?
방법은

stationary phase에 있는 cell(10^8 CFU/mL) 수를 미리 측정해놓고 이 측정해놓은 값을 기준으로 serial dilution하여 OD 값을 측정하여 그린 것입니다.

 

 

 

#standard curve
 
#E.coli
 
#OD측정
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.12.19   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

점선과 실선은 무엇인가요?

STD curve를 잘못 그린것 같습니다.

- stationary phase에 있는 cell(10^8 CFU/mL) 수를 미리 측정해놓고..

: 10^8/ml의 OD600이 얼마나 나오고 각 point에서 몇 plate씩 spreading했나요?

올챙이tape  |  2019.12.19   

실선은 OD값과 세균수(로그값) 사이의 관계를 나타내고

점선은 추세선을 나타낸 것인데 선형관계를 나타낸 것인데 저렇게 나왔습니다..

8 h에서 OD값은 3.1*10^8 CFU/mL였습니다

plating은 각 희석배수 마다 2개씩 했습니다

뭘 잘못한 건가요??ㅜㅜ

대왕개구리SPEED  |  2019.12.19   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 8 h에서 OD값은 3.1*10^8 CFU/mL였습니다.

1. OD값이 얼마였나요?

2. 그리고 8h는 정지기인가요?

3. 2plate씩은 수가 너무 적고 OD vs cfu를 구하려면 5plate 정도는 해야 오차가

적습니다.

그리고 실험한 순서를 좀더 정확히 서술해 주세요.

올챙이tape  |  2019.12.20   

1. 8 h에서 OD값은 17.167이었습니다

2. 네 staionary phase입니다

3. 제가 8h에서 10^8CFU/mL라는 것을 먼저 확인했습니다.

그 후에 새로 배양을 해서 8h 배양한 후 10^7, 10^6, 10^5, 10^4....이렇게 serial dilution을 하고 각각 plate 2장에 spreading하고 OD값도 측정을 하였습니다.

- 또 궁금한 점이 있는데

제가 배양을 할 때 6h에 stationary phase에 딱 도달을 해서 8h때인 것을 사용했는데 다른 논문을 보니 stationary phase라고 하면 24h배양한 걸 많이 사용하는 것 같았습니다.(E.coli의 경우)

그래서 stationary phase라면 24h인 것을 사용하는 것이 맞는 것인지 궁금합니다

그리고 plate를 5개는 하는게 좋다고 하셨는데 각 희석배수마다 5개씩을 해야한다는 말씀인가요?? 즉, 10^1~10^3까지라면 3X5=15개를 해야한다는 것인가요??

- 추가적으로 plating말고 미생물의 death phase를 확인할 수 있는지 알고 싶습니다..ㅠㅠ

계속 답변 달아주셔서 감사합니다...

 

 

 

 

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