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우리의 희망은 primer가 우리가 계획한 바로 그곳에만 붙기를 기대합니다.
하지만 primer는 target에 붙을 sequence와 유사한 sequence가 있으면 붙어서 엉뚱한 크기의 PCR product를 만듭니다. 보통 nonspecific producr 니 뭐니 그런 이름으로 불립니다.
annealing temperature를 높이는 등의 방법으로 nonspecific 을 줄이기도 합니다.
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레벨1
highdelok
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19.12.16 14:28
Primer에 적절한 condition이 아닐 경우 저런 non-specific band가 많이 생기더군요.
Primer에 맞는 annealing temp를 다시 조정해보기 바랍니다
1. 피시알 컨디션 (템플레이트 양, 프라이머 어닐링 온도 등)
2. DNase 처리