실험 별 시작 시간에 따라 가능합니다.

1st day 아침일찍 TF, plate 40도 배양, 저녁늦게 colony 접종 및 broth 40도 배양

colony가 아주 작기 때문에 신경을 기울여 접종하면 가능합니다.

평소 배양 rpm보다 조금 더 올리고 배양 용기 대비 배지량도 평소 대비 50%~60%

로 해서 배양하면 빨리 자랍니다.

2nd day 오후 plasmid prep. 및 전기영동 확인, 제한효소 처리 및 확인

TF 직후의 plasmid copy는 최고 많은양을 균이 가집니다.

평소보다 균체량이 적어도 plasmid양은 최소 5배 이상 많이 나옵니다.

예전에 급해서 몇번 해본적이 있는데 충분히 가능합니다.

이건 정말 급할때만 쓰긴했었는데

워싱이 관건이긴 합니다만...

저는 배지위에 콜로니 긁어서 그걸로 키트 라이시스버퍼로

prep 해서 쓴적 있습니다.

키트쓰시다 보면 적정 사이즈만 프렙 컬럼에 걸려서 생각보다

잘 나왔습니다. 그래도 시간이 충분하면 배양해서 쓰는게 좋습니다.

첫째날 오후에 transformation of DH5a

둘째날 오전 일찍 colony pick & 접종, 저녁 늦게  mini prep kit 이용 plasmid 추출