[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
온라인 진행 국제학회 참관기 접수중
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 2966  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 혈액에서 immunoprecipitation이 가능할까요?
개구리클레엉(대학원생)  | 2019.12.13 17:27

안녕하세요.

제가 혈장에서 미량의 단백질을 찾아내야하는데, 해당 단백질 form이 여러가지라 ELISA로는 구분이 안되서 SDS-PAGE를 통해 사이즈별로 나누어야 detect이 가능합니다.

혈장으로 여러차례 western 시도를 하였으나 detect이 잘 되지 않았는데요, 여러가지 생각을 해보다가 타겟으로 하려는 단백질이 무엇인지 알고 있으니 항체를 이용해 immunoprecipitation을 해볼 수 도 있겠다는 생각이 들었습니다.

 

현재 연구실 선배들중 immunoprecipitate 을 해보신 분이 아무도 안계시고, 선행 논문들도 전부 cell sample에서만 immunoprecipitate을 한 결과들이며 저도 경험이 전무한 상태인데요, 이론적으로 이 실험이 가능할 거 같긴한데 제가 간과하고 있는 부분들이 있는지 조언 부탁드립니다.

#immunoprecipitation
 
#westernblot
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.12.13   

충분히 가능합니다.

western에서 band detection이 안된것이 조금 걸리네요..

serum에 있는 Ab를 전처리를 통해 어느정도 먼저 제거해주면 좋을 것 같습니다. 

개구리클레엉  |  2019.12.14   

detection 이 아예 안되진 않았습니다. 

다만 albumin 과 유사한 사이즈라(약 50kda) 알부민에 눌려서 분리가 잘 되어 보이지 않아서 밴드가 명확히 판단이 안가기에....ip를 생각해보았습니다ㅠ 

 

전처리라 하심은 어떠한 것을 의미하시는지 알려주실 수 있을까요?

대왕개구리SPEED  |  2019.12.14   

알부민은 66kDa인데 50K가 잘 안나오지는 않습니다.

gel %를 조금 내리면 서로간섭이 없는 분자량 차이입니다.

그리고 목적 단백질이 여러 form이라고 했는데 분자량은 50kDa하나만 target

인가요?

serum안의 Ab를 제거한 후에 target protein의 Ab로 captre하는 것이 좋을 듯

합니다.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
바이오디 바이오디
Wet 방식의 장점에 속도와 편리함까지 지닌 eBlot & eStain 파격 할인 (8.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 할인 행사 (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
nanoString 체험단 / Denovix 할인 행사! / LAMP 2X Master Mix with UD.. (8.27까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
2/6  좌우
136,000129,200
158,40047,600
230,000
388,500116,600
739,000702,100
924,000
80,40024,200
136,000
50,00015,000
201,30060,400
309,000
47,20044,900
238,70071,700
555,000
793,400238,100
242,40072,800
143,800136,700
139,000132,100
379,000
245,20073,600
246,60074,000
22,7006,900
887,200266,200
79,50075,600
최근등록   더보기 >
항균물질 추출   08.15
His fusion 공벡터 pull down 후 western blot 시에 검정 안 됨   08.14
단백질 구조에 영향을 주지 않으면서 종결코돈을 다른 아미노산으로 바꿀 수 있는 방법이 있을...   08.14
genomic(template) DNA 전기영동 band   08.14
SUSY7/ura3 yeast mutant 획득방법   08.14
Agrobacterium transformation을 위한 vector를 디자인하려고 합니...   08.14
crisper primer에 대해 알고 계신 분 있으신가요?   08.14
촉매제 = 교차결합제 = crosslinker 가 많이 들어가면 함수율이 낮아지지 않나요?   08.14
이미 사망한 쥐로 IHC 샘플 만들어도 되나요?   08.14
PCR 사이즈와 조건 검증   08.14
생화학분자생물학회
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크