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 전체 > Molecular Biology-DNA > Sequencing
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질문 ccdB 유전자 관련 질문,,
알이윤비(일반인)  |  2019.12.12 16:10

entry vector를 대장균에 넣어서 불리는게 가능한가요?

대장균은 DH5알파를 사용하려고 하는데

어디에서는 entry vector에 ccdB가 들어있어서 DH5알파에 넣으면 안된대요

사용할 entry vector 는 pENTR입니다. 

#entry vector
 
#ccdB
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이CHINyo76_philekorea  |  2019.12.12   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

ccdB gene은 Toxin ccdB를 발현하여 박테리아를 죽이는 lethal gene 이기 때문에 DH5a에서 발현을 하게되면 cell growth가 진행되지 않을겁니다.

하지만 cloning 과정에서 ccdB gene이 target DNA fragment로 교체되거나 첨가되어 ccdB gene의 transcription이 억제되면 Toxin ccdB가 발현되지 않게 되어  DH5a의 growth는 진행될 수 있으며 target DNA fragment를 포함하는 clone을 sreening 할 수 있습니다. 

 

꽃개구리느림보  |  2019.12.14   
벡터맵을 확인해보세요.
Entry vector에는 대개 ccdB가 없는 상태입니다.
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