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 전체 > Molecular Biology-DNA > Transformation
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질문 transformation 후 전기영동 결과 보는법
알박현하(대학생)  |  12.04 08:09
첨부파일 파일첨부: KakaoTalk_20191203_194643376.jpg (821 KB)
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안녕하세요 이번에 학교에서 DH5a에 hEGF transformation 을 하고 agarose 전기영동을 하였는데요.

전기영동 보는법을 몰라서 질문을 드립니다.

100v로 33분 했고 line은

1.DNA 마커

2. PCR DNA

3.제한효소 (RE)

4.pRset

 

반대쪽은 저거의 반대로 입니다

 

반대쪽에서 PCR DNA를 보면 혼자만 맨 끝 쪽에 위치 하는데

PCR DNA의 결과가 튄건지 제한효소가 튄건지 궁급합니다....

#transformation
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채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

제가 하는 EGF(상피성장인자)는 53개 아미노산으로 약 159bp의 사이즈 입니다.

그렇다면 작은 사이즈로 나오는게 맞을것입니다.

금개구리안재진  |  12.04 09:33  
실험에 대한 전반적인 내용도 필요할 것으로 보입니다.

하지만 결과를 분석하자면
2set(1234 well) 중 반대로 라고 설명하신 팀이 원하는 결과를 확인하신겁니다.

첫세트에서 우선 hEGF(2well)가 아닌 다른 모르는 밴드가 잡힌 것 같습니다.이는 밴드를 잘라 서열분석 해보아야 알 수있을듯합니다(하지만 학교에서 서열분석까지는 하지않을듯합니다). 또한 제한효소(3well)처리시 DNA가 없는걸보아 트랜스포매이션 후 이상한 DNA를 얻었거나? .. 이 점 때문에 자세한 실험내용이 필요합니다.
그리고 3번 4번 설명이 바뀐게 아닌지.. 예상해봅니다
(제한효소 처리시, vector인 PRSET보다 젤상에서 크기가 작아지며 밴드모양이 지글?거리는 것으로 알고 있습니다..)
알alnlbook  |  12.05 02:04  
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