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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 플라스미드 dna pcr후 전기영동 질문있습니다!
알Blueware(대학생)  |  12.04 03:22
플라스미드 dna를 제한효소 처리하지 않고 pcr 후에 gel 전기영동을 하였는데
결과적으로 보면 밴드가 두개 생겼습니다
하나의 밴드는 사이즈를 추정해보니까 플라스미드dna에서 저희가 원하는.. 그러니까 프라이머 부착해서 생성된 선형dna 같더라구요..
근대 나머지 하나는 아무리 생각해도 어떤 형태인지 모르겠습니다.
하.. 어렵습니다...

그래서 질문이

1. 같은 길이의 dna와 rna를 전기영동한다면 같은 위치에 밴드를 형성하게 되나요?

2. Pcr후 원래의 플라스미드dna는 어떤 형태로 존재하게 되나요? 단일가닥 원형의 dna에 짧은 생성물이 붙어있는 건가요?
아니면 앞의 단일가닥 원형의 dna에 짧은 생성물이 붙어있는 분자에서 결합되지 않은 부분끼리 다시 수소결합해서 하트모양..?처럼 다이머같은 모양..?을 형성하는 건가요?

3. Pcr에서 열 변성을 주어 수소결합을 끊는거는 알겠는데.. 플라스미드 dna같은 경우는 끊어지면 단일가닥 원형 dna 2개가 되는 건가요?

4. 혹시 pcr에 대해 알아볼 수 있을만한 책 추천해주실수 있나요..?
#Rna
 
#Dna
 
#플라스미드
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

plasmid와 insert DNA 의 size, PCR product들의 size정도는 알려주셔야 할 것 같네요

그리고 annealing temp. 를 상승시켜도 같은 결과가 나오는지도 확인해보시는게 좋겠네요

꽃개구리Applied_Microbe  |  12.04 09:10  

1. 같은 길이의 dna와 rna를 전기영동한다면 같은 위치에 밴드를 형성하게

되나요?

: 이론적인 분자량은 ddDNA와 ssRNA는 2배 차이입니다.

2. Pcr후 원래의 플라스미드dna는 어떤 형태로 존재하게 되나요?

: PCR mixture에 남아있습니다.

3. Pcr에서 열 변성을 주어 수소결합을 끊는거는 알겠는데..

플라스미드 dna같은 경우는 끊어지면 단일가닥 원형 dna 2개가 되는 건가요?

: 분자량이 너무 크지 않으면 dsDNA로 존재를 하고 분자량이 100kb 정도 이상의

plasmid면 일부 ssDNA, 일부 dsDNA로 존재를 합니다.

대왕개구리SPEED  |  12.04 09:58  
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