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질문 DNA의 EtOH농도에 따른 용해도가 궁금합니다.
알파닥파닥(대학생)  |  2019.11.26 18:03

washing buffer 제조시 보통 EtOH의 비중이 buffer 총량의 70~80% 농도를 사용한다고 알고 있는데, 그 이유가 EtOH의 농도가 낮으면 DNA나 RNA가 용해되기 쉬워 washing 과정 중 손실의 위험이 있고, 반대로 EtOH 농도가 너무 높으면 lysis 과정에서 사용된 salt의 용해도가 낮기때문에 염이 제거가 되지않아 차기 실험에 사용 시 문제가 되기때문이라고 알고있습니다. 

정확히 EtOH농도에 따른 안전범위라고 해야하나? 최하,최대 몇 % EtOH 농도를 사용하여 washing 했을때 DNA/RNA의 손실이 다음 실험에 사용할때 문제가 없다라는 것에 대한 자료같은게 있을까요??

#EtOH
 
#DNA
 
#washing buffer
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대왕개구리SPEED  |  2019.11.26   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

학교 다닐때 실험에서 확인을 해봤는데 min 70% ~ max 80%로 보면 됩니다.

일정 DNA를가지고 실험해보면 loss율 측정이 가능하며 salt문제도 제한효소로

잘라보면 salt제거가 제대로되지 않아 일정 농도 이상의 salt가 존재할때는

잘리는 효율이 떨어지는 것을 확인할수 있습니다.

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