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질문 NFkB pathway 관련 실험을 할 때 Bay 11-7082 사용 문제
알땅콩군(대학생)  |  2019.11.25 15:53
첨부파일 파일첨부: 그림1.png (1.13 MB)
이미지 첨부파일

안녕하세요. 최근 진행하고 있는 실험에서 해결되지 않는 문제가 생겨 여기 글을 올립니다.

 

저희는 Mouse embryonic fibroblast 세포를 사용하여 특정 조건에서 NFkB의 activity가 변한다는 실험을 수행하고 있습니다. 이를 특정 조건에서 NFkB의 nuclear translocation이 증가하고 IkB의 발현이 감소한다는 것을 실험을 통해 증명하였고 이 상황이 NFkB inhibitor인 Bay 11-7082를 통해 조절된다는 결과를 얻으려 하고 있습니다.

 

문제는 저희가 Bay 11-7082를 단독으로 처리할 때 cell morphology가 크게 변한다는 점입니다. 저희는 논문검색을 통해 통용되고 있는 농도인 10uM을 사용하였고 시간은 1시간 처리하였습니다만 세포가 이미 너무 큰 데미지를 받은 것으로 보이고 있습니다. (첨부 사진 참고)

 

다른 논문들을 보면 MEF cell에서 Bay 11-7082를 10uM로 24시간 처리한 뒤 NFkB activity를 확인한 논문들도 보이고 있는데 제가 가지고 있는 상황이 맞다면 그런 결과도 세포가 많은 데미지를 입은 상황에서 실험을 진행한 것인가 의심도 되고 있습니다.

 

혹시 Bay 11-7082를 사용하신 분이 있으신지요. 있으시다면 원래 Bay 11-7082라는 것이 toxicity가 심한 것인지 알고 싶습니다. 만약 다른 NFkB inhibitor가 있다면 그것도 추천해주실 수 있으신지요.

 

실험 고수님들의 답변 기다리고 있겠습니다. 감사합니다.

#NFkB
 
#Bay 11-7082
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.11.25   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

네.. necrosis를 일으키기 때문에 독성이 많습니다.

cell 마다 조금씩 다른지만 30uM, 3시간 처리 시 100% cell death가 되는 경우도

있습니다. 

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